製備(bèi)液相(xiāng)色(sè)譜(pǔ)儀的使(shǐ)用步驟(zhòu)
一，開機(jī)
1，接(jiē)通(tōng)電(diàn)腦和儀器電(diàn)源(接通電(diàn)源(yuán)之前可(kě)先把吸(xī)頭拿到要使(shǐ)用的流(liú)動(dòng)相瓶中)；
2，開儀(yí)器(qì)電源開(kāi)關(guān)，一(yī)般先上後下，下為檢(jiǎn)測器開關；
3，檢(jiǎn)查(chá)流動(dòng)相是否夠(gòu)，儀(yí)器上記錄的溶(róng)劑(jì)量時候(hòu)正(zhèng)確(què)；
4，開(kāi)電(diàn)腦；
5，打開儀(yí)器(qì)聯(lián)機(jī)軟(ruǎn)件進入界(jiè)麵(miàn)，點(diǎn)擊(jī)啟(qǐ)動(dòng)設(shè)置(zhì)泵流速為10，此時儀器中(zhōng)應該有液體(tǐ)流出(chū)；
6，點擊平衡(héng)然後點擊(jī)每(měi)個波長和(hé)調整；
衝一段(duàn)時間，待壓(yā)力穩定後(hòu)可以(yǐ)進樣。
二，進樣
1，將(jiāng)進(jìn)樣(yàng)器扭到(dào)load朝上，吸取一定量(liáng)待(dài)分離(lí)液(yè)，快速(sù)注入，做(zuò)過的(dí)是吸取0.2毫升；
2，點擊(jī)控製界麵菜單欄中(zhōng)“運行控(kòng)製(zhì)”按(àn)鈕(niǔ)—樣(yàng)品信息—設(shè)置信息存儲路徑(jìng)(每次都(dū)要做)；
3，扭動進樣器(qì)，使處於inload狀(zhuàng)態，保(bǎo)留時間開始計(jì)時；
4，接(jiē)峰(fēng)；
5，所有(yǒu)峰出來(lái)後(hòu)，點擊菜單(dān)欄中(zhōng)的中斷(duàn)—中斷，準備(bèi)重復進樣(yàng)。
三，關機
1，點(diǎn)擊中斷後衝(chōng)幾分(fēn)鐘(zhōng)，將(jiāng)流(liú)速(sù)設為0，待(dài)壓(yā)力(lì)為0後將(jiāng)吸(xī)頭轉移(yí)到甲醇中，並(bìng)把(bǎ)流速設為(wéi)10；
2，衝到(dào)已(yǐ)經(jīng)沒有東西被衝下為(wéi)止，一(yī)般需要半個(gè)小時。一般此時(shí)壓力(lì)早(zǎo)已穩定(dìng)；
3，將流速(sù)設為(wéi)0，點擊界(jiè)麵上(shàng)的(dí)關閉(在啟(qǐ)動旁邊)；
4，關閉(bì)窗口，彈(dàn)出的窗口(kǒu)都(dū)點肯(kěn)定(dìng)的，如確定(dìng)是等(děng)。
製備液相色譜儀(yí)常(cháng)見(jiàn)的故(gù)障(zhàng)
1，氣泡溢(yì)出(chū)
流動相(xiāng)內有(yǒu)氣(qì)泡，關閉(bì)泵，打開(kāi)泄壓(yā)閥(fá)，打開(kāi)purg鍵(jiàn)，清洗脫氣，氣泡不斷從過濾器冒出，進(jìn)入(rù)液相(xiāng)色(sè)譜流(liú)動相，無(wú)論(lùn)打開(kāi)purge鍵幾次，都無(wú)法(fǎ)清除不斷(duàn)產生的(dí)氣(qì)泡。原因過(guò)濾(lǜ)器長(cháng)期沉(chén)浸於乙酸(suān)銨(ǎn)等(děng)緩衝(chōng)液(yè)內，過(guò)濾(lǜ)器內(nèi)部由(yóu)於黴菌(jūn)的生長(cháng)繁(fán)殖(zhí)，形成(chéng)菌團(tuán)，阻(zǔ)塞了(liǎo)過濾器(qì)，緩衝(chōng)液難以流暢地(dì)通過過濾(lǜ)器，空(kōng)氣(qì)在(zài)泵的(dí)壓(yā)力作用(yòng)下經(jīng)過濾器進入流動(dòng)相。處理(lǐ)過(guò)濾(lǜ)器浸泡於(yú)5%硝酸溶液(yè)中(zhōng)，超聲清洗(xǐ)幾(jī)分(fēn)鐘(zhōng)即可；亦(yì)可(kě)將(jiāng)過(guò)濾器(qì)浸泡(pào)於5%硝(xiāo)酸溶液(yè)中12～36小(xiǎo)時(shí)，輕輕(qīng)震蕩幾次(cì)，再(zài)將過(guò)濾器(qì)用(yòng)純(chún)水清洗幾次，打開泄(xiè)壓閥，打開purge鍵(jiàn)清(qīng)洗脫氣(qì)，如仍(réng)有(yǒu)氣(qì)泡(pào)不斷從(cóng)過濾器冒出(chū)，繼續將過濾器(qì)浸泡於5%硝(xiāo)酸(suān)溶液中，如(rú)沒(méi)有(yǒu)氣泡(pào)不斷(duàn)從過濾器(qì)中冒出，說明(míng)過(guò)濾器(qì)內部(bù)的黴菌菌團已(yǐ)被硝(xiāo)酸破壞，流動(dòng)相可(kě)以流暢地通過過(guò)濾(lǜ)器(qì)。打(dǎ)開泄壓閥，打開泵(bèng)，流(liú)速(sù)調至1.0～3.0ml/min，純水(shuǐ)衝(chōng)洗過(guò)濾器1小時(shí)左右。即(jí)可將(jiāng)過濾器清洗幹淨。關(guān)閉泄壓閥，純(chún)甲(jiǎ)醇衝(chōng)洗半(bàn)小時即可。
2，峰麵(miàn)積(jī)重復(fù)性不(bù)佳
(1)進樣(yàng)閥漏(lòu)液。
(2)加(jiā)樣(yàng)針(zhēn)不到(dào)位(wèi)。
(3)液量不足。處理對(duì)於*種情(qíng)況(kuàng)更(gēng)換(huàn)進樣(yàng)閥(fá)墊(diàn)圈(quān)；對於第(dì)二種(zhǒng)情況保(bǎo)證(zhèng)加樣針插(chā)到底，注(zhù)射(shè)樣品溶液(yè)後(hòu)須快(kuài)速(sù)，平(píng)穩地從(cóng)LOAD狀(zhuàng)態轉(zhuǎn)換到INJECT狀(zhuàng)態(tài)，以(yǐ)保證進(jìn)樣量的準確(què)。日(rì)常工(gōng)作中(zhōng)，液(yè)相色譜(pǔ)儀(yí)的(dí)保(bǎo)養非常(cháng)重(zhòng)要，如要注意(yì)不要(yào)讓(ràng)空氣(qì)進(jìn)入(rù)輸液係統和(hé)高(gāo)壓泵中，儲(chǔ)液器內的溶液如(rú)長(cháng)時間(jiān)未(wèi)用應(yīng)清(qīng)洗(xǐ)儲液器並(bìng)更換溶液，每次用完色譜儀(yí)後(hòu)緩(huǎn)衝液要(yào)用純(chún)水衝(chōng)洗(xǐ)幹(gān)淨(jìng)，防(fáng)止無機鹽析出(chū)或(huò)沉積(jī)；樣(yàng)品(pǐn)的(dí)前處理也很重(zhòng)要，任(rèn)何樣(yàng)品都(dū)要盡(jìn)可(kě)能(néng)地去(qù)除雜質(zhì)，*溶(róng)解，盡(jìn)量(liáng)減少(shǎo)對色譜(pǔ)柱的汙染(rǎn)，以延長色譜柱的使用壽命(mìng)，同時(shí)避(bì)免(miǎn)注(zhù)射過濃的(dí)樣品溶(róng)液(yè)，以(yǐ)免殘(cán)留液(yè)在(zài)進(jìn)樣(yàng)閥(fá)內(nèi)析(xī)出(chū)固(gù)體引(yǐn)起堵(dǔ)塞(sāi)；色(sè)譜柱(zhù)作(zuò)好(hǎo)標記，用於(yú)不同分析(xī)目(mù)的的色譜柱(zhù)不要(yào)混(hùn)用等(děng)。
3，柱壓高原(yuán)因(yīn)
(1)緩(huǎn)衝液鹽(yán)分如(乙(yǐ)酸銨(ǎn)等)沉積(jī)於柱內(nèi)。
(2)樣品汙染沉積。處(chǔ)理對(duì)於*種(zhǒng)情況(kuàng)先用40～50℃的(dí)純(chún)水(shuǐ)，低速(sù)正向衝(chōng)洗柱子，待柱(zhù)壓逐漸(jiàn)下降(jiàng)後，相應提高流速(sù)衝洗，柱壓大(dà)幅(fú)度下降(jiàng)後(hòu)，用常(cháng)溫(wēn)純水(shuǐ)衝洗(xǐ)，之後(hòu)用純甲醇(chún)衝洗(xǐ)柱子(zǐ)30分鐘(zhōng)；對於(yú)第(dì)二種(zhǒng)情(qíng)況，由(yóu)樣品(pǐn)的沉(chén)積引起汙(wū)染(rǎn)的C18柱，和純(chún)水反(fǎn)向衝洗(xǐ)柱子(zǐ)，然後換成甲醇衝洗(xǐ)，接著用(yòng)甲(jiǎ)醇+異(yì)丙醇(4+6)衝(chōng)洗(xǐ)柱(zhù)子(衝(chōng)洗(xǐ)時間的長短(duǎn)由(yóu)樣品汙染的情況而(ér)定(dìng))，再用換成甲(jiǎ)醇衝洗，然後(hòu)用純水(shuǐ)衝洗(xǐ)，zui後甲醇衝洗正向衝洗柱子30分鐘以上(shàng)。
4，既無(wú)壓力(lì)指示，又無液(yè)體(tǐ)流(liú)過(guò)
(1)泵(bèng)密封(fēng)墊(diàn)圈(quān)磨(mó)損。
(2)大(dà)量氣(qì)泡進(jìn)入(rù)泵體(tǐ)。處理對於(yú)*種(zhǒng)情(qíng)況(kuàng)，更換(huàn)密封墊圈(quān)；對於(yú)第二種情況，在泵作(zuò)用(yòng)的同(tóng)時，用一(yī)個50ml的玻(bō)璃針(zhēn)筒(tǒng)在泵的出(chū)口(kǒu)處(chǔ)幫助抽(chōu)出空(kōng)氣。
5，壓力(lì)波動(dòng)大，流(liú)量不穩定(dìng)
原因係統(tǒng)中有(yǒu)空氣或者(zhě)單向(xiàng)閥(fá)的寶石(shí)球(qiú)和閥座(zuò)之間(jiān)夾有異物，使(shǐ)得兩者不能密封。處理工作中(zhōng)注(zhù)意(yì)觀(guān)察流(liú)動相的量，保(bǎo)證(zhèng)不鏽鋼濾器沉(chén)入(rù)儲液器瓶底，避免(miǎn)吸入(rù)空氣，流動(dòng)相(xiāng)要(yào)充(chōng)分脫氣(qì)。如為單(dān)向閥和(hé)閥座(zuò)之(zhī)間夾(jiā)有(yǒu)異(yì)物，拆下單(dān)向閥，放(fàng)入盛有丙酮的燒杯用超(chāo)聲(shēng)波(bō)清(qīng)洗。
6，出峰不(bù)佳，峰分(fēn)叉(chā)
(1)色譜柱(zhù)被汙染(rǎn)。
(2)柱頭填料(liào)塌陷。處(chǔ)理對於(yú)*種情況，先(xiān)用(yòng)純(chún)水反(fǎn)向(xiàng)衝洗柱子，然(rán)後換(huàn)成甲醇(chún)衝(chōng)洗，接著(zhuó)用甲醇+異丙醇(4+6)衝(chōng)洗(xǐ)柱(zhù)子(衝洗時(shí)間的(dí)長(cháng)短由(yóu)樣品汙染的情況而定(dìng))，再換成(chéng)甲醇衝(chōng)洗，然(rán)後(hòu)用純水衝(chōng)洗，zui後(hòu)甲醇(chún)衝(chōng)洗(xǐ)正(zhèng)向(xiàng)衝洗柱子30分鐘以(yǐ)上(shàng)。如衝(chōng)洗後(hòu)依然出(chū)峰不佳，則(zé)考慮第二種(zhǒng)情(qíng)況。對(duì)於第二(èr)種(zhǒng)情(qíng)況，擰開(kāi)柱頭，檢查柱(zhù)填料(liào)是否(fǒu)硬結(jié)或(huò)塌陷(xiàn)。去除硬結部分(fēn)(汙(wū)染的(dí)填料)，裝入新(xīn)填(tián)料，滴一(yī)滴甲(jiǎ)醇，填(tián)料(liào)下(xià)陷，再填，用與柱內徑相同的(dí)頂端(duān)平滑(huá)的(dí)不鏽鋼(gāng)杆壓(yā)緊，再(zài)填(tián)平(píng)，滴甲醇，再壓緊反(fǎn)復幾次，直至(zhì)裝滿填平。柱(zhù)頭用(yòng)甲(jiǎ)醇衝(chōng)洗(xǐ)幹(gān)淨，擦淨柱外(wài)壁的填料(liào)，擰緊柱頭，用純甲(jiǎ)醇衝洗30分(fēn)鐘以(yǐ)上(shàng)。
以(yǐ)上(shàng)便是今天(tiān)關於使用製備液相色譜儀的時候(hòu)遇到(dào)故(gù)障不要怕，趕(gǎn)緊收藏本文(wén)的(dí)全(quán)部分享了(liǎo)，希望對大家今後使(shǐ)用本設備(bèi)能(néng)有幫(bāng)助(zhù)。
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