製(zhì)備液相色(sè)譜(pǔ)儀(yí),是一款(kuǎn)功能(néng)*,兼(jiān)容性(xìng)高,效(xiào)率(shuài)高的模(mó)塊(kuài)化製備(bèi)色譜係統。該儀器(qì)是在經典(diǎn)色譜的基礎(chǔ)上,引用(yòng)氣(qì)相色譜理(lǐ)論,從技術上(shàng)將流(liú)動(dòng)相改為高壓輸送的(dí)。實驗(yàn)室使用的測試儀器(qì)很(hěn)多,其中(zhōng)液(yè)相色譜就(jiù)是其中之一。
製備(bèi)液相(xiāng)色(sè)譜(pǔ)儀的柱(zhù)越長,分離度越(yuè)高,但柱壓更(gēng)高,分離(lí)所需時(shí)間(jiān)更長(cháng);但(dàn)分離度與(yǔ)理論塔板(bǎn)數(shù)的(dí)平方根成正比,所(suǒ)以一昧(mèi)增(zēng)加(jiā)柱(zhù)長並不是很有(yǒu)效(xiào)的(dí)分離手(shǒu)段(duàn),一般(bān)情(qíng)況下,150mm,5um的填料可(kě)以提供(gōng)足(zú)夠的(dí)塔(tǎ)板(bǎn)數。
流動相通過高壓泵進入係統(tǒng),樣品溶液(yè)通(tōng)過注射(shè)器(qì)進(jìn)入流(liú)動相,流動(dòng)相(xiāng)加(jiā)載(zǎi)到(dào)色(sè)譜(pǔ)柱(zhù)(固定相)中。由於(yú)樣品溶液中各組分在(zài)兩相中的分配(pèi)係數不(bù)同,經過兩相(xiāng)反復吸附(fù)-解(jiě)吸(xī)分(fēn)配(pèi)後(hòu),各組(zǔ)分(fēn)的運動(dòng)速度有很(hěn)大的(dí)不同(tóng)。它被分離(lí)成一個(gè)單(dān)獨的組(zǔ)件,然(rán)後依次(cì)從列中流(liú)出。當(dāng)樣品濃(nóng)度(dù)通(tōng)過(guò)檢(jiǎn)測(cè)器時(shí),樣(yàng)品濃度被轉換(huàn)成電信(xìn)號(hào)並(bìng)傳(chuán)送(sòng)給記錄器(qì),數(shù)據(jù)以(yǐ)地(dì)圖(tú)的(dí)形式(shì)打印出(chū)來(lái)。
而(ér)對於粒徑來說(shuō),它影(yǐng)響(xiǎng)的(dí)則是(shì)色譜分離(lí)度(dù),粒徑(jìng)越(yuè)小(xiǎo),分離越快,柱效(xiào)越高,但(dàn)柱壓(yā)力(lì)越(yuè)高,柱容(róng)易被(bèi)汙(wū)染(rǎn),導致(zhì)柱壽命(mìng)降低(dī)。常見(jiàn)分(fēn)析柱(zhù)通(tōng)常(cháng)使用5um填料,復(fù)雜(zá)的(dí)多(duō)組分樣(yàng)品(pǐn)分(fēn)離(lí)一般使(shǐ)用(yòng)3.5um粒徑,更大內(nèi)徑的(dí)製備色(sè)譜(pǔ)柱通常使用更大(dà)的粒徑(jìng)。
如(rú)果(guǒ)固定相(xiāng)選擇(zé)是正確,但是分離度不夠(gòu),那麼選用更小(xiǎo)的粒度的(dí)填料是(shì)很有(yǒu)用的。3.5um填(tián)料填(tián)充(chōng)柱的(dí)柱效比相同(tóng)條件(jiàn)下(xià)的(dí)5um填料的(dí)柱效(xiào)提高近(jìn)30%;然(rán)而,3.5um的(dí)色譜柱(zhù)的背(bèi)壓卻是5um的(dí)2倍,因(yīn)此如(rú)何(hé)選擇填料粒徑(jìng)需要(yào)根(gēn)據(jù)現實情(qíng)況(kuàng)而定。