二(èr)維(wéi)液相(xiāng)色譜(pǔ)分(fēn)離純(chún)化係(xì)統是(shì)一(yī)種高效的(dí)色(sè)譜(pǔ)分離技術(shù),通過(guò)將兩(liǎng)個不同(tóng)的(dí)色(sè)譜柱聯(lián)接在(zài)一起,實現(xiàn)對復雜(zá)樣(yàng)品的(dí)更好分離(lí)和純化。該係(xì)統(tǒng)由柱溫(wēn)控製係統(tǒng),采(cǎi)樣係(xì)統,峰捕獲(huò)裝(zhuāng)置(zhì),注射係統,檢(jiǎn)測器和(hé)數(shù)據(jù)處理(lǐ)係(xì)統等構成。2D-LC技術在天然(rán)產物(wù)分(fēn)離(lí),藥物分(fēn)析(xī),蛋白質分析(xī)和環境(jìng)分析等領(lǐng)域得到了廣泛應用。

1.第一維(wéi)分(fēn)離:樣(yàng)品首(shǒu)先經過(guò)第(dì)一種(zhǒng)色(sè)譜(pǔ)柱進行(háng)分離,通常(cháng)采用高速液(yè)相(xiāng)色(sè)譜(HPLC)或(huò)超高(gāo)效液相(xiāng)色譜(UHPLC)等。這(zhè)個步(bù)驟實現對樣(yàng)品(pǐn)的初步分離和預(yù)處(chǔ)理(lǐ)。
2.峰捕獲:在第(dì)一(yī)維分離(lí)後,待分離(lí)的(dí)成(chéng)分被收(shōu)集在不(bù)同(tóng)的(dí)分(fēn)離容器(qì)中,通(tōng)常(cháng)是以(yǐ)毛細(xì)管(guǎn)或(huò)固定(dìng)相為基(jī)礎,形成多(duō)個(gè)小(xiǎo)峰(fēng)。
3.第二維(wéi)分離:將(jiāng)第一(yī)維(wéi)分離(lí)後(hòu)的(dí)每(měi)個小峰,逐(zhú)一(yī)注入(rù)到(dào)第(dì)二種色譜柱中進(jìn)行進一步(bù)分(fēn)離。第二柱(zhù)通常采用離(lí)子(zǐ)交(jiāo)換色(sè)譜,正(zhèng)相色(sè)譜或反相色譜(pǔ)等(děng)。通過這種方式,可(kě)以(yǐ)實現(xiàn)對復雜樣品(pǐn)的更精確分離(lí)和純(chún)化(huà)。
4.數據(jù)處(chǔ)理:通過(guò)對兩個維(wéi)度的分離結果進行數據(jù)處理和(hé)解(jiě)析(xī),可(kě)以得到(dào)更(gēng)準確的(dí)結果。數據處(chǔ)理方法(fǎ)包(bāo)括(kuò)峰(fēng)識別,峰提(tí)取,峰匹配(pèi)等(děng)。
主要組成(chéng)部分構成(chéng):
1.柱溫控(kòng)製(zhì)係統(tǒng):用於控製兩個色(sè)譜柱(zhù)的溫度,以保(bǎo)證分離(lí)的穩定性(xìng)和(hé)重復性。
2.采樣係(xì)統:負(fù)責自動加(jiā)載和噴射樣(yàng)品進(jìn)入第(dì)一(yī)維(wéi)色(sè)譜(pǔ)柱進行(háng)分(fēn)離(lí)。
3.峰捕獲裝置(zhì):根(gēn)據第一(yī)維分離的(dí)結果,將待分(fēn)離的(dí)成分(fēn)分別收(shōu)集(jí)到(dào)不(bù)同容(róng)器(qì)中。
4.注射(shè)係統(tǒng):負責將不同峰上(shàng)的(dí)物質依次注(zhù)入到(dào)第二維色譜柱(zhù)中(zhōng)進行(háng)進一步(bù)分離。
5.檢測(cè)器(qì):用(yòng)於檢測和記(jì)錄分離後(hòu)的物質在不(bù)同(tóng)峰上的(dí)信號(hào)強度和保留時(shí)間(jiān),常(cháng)見的有紫外-可(kě)見吸收(shōu)檢測(cè)器(UV-VIS),熒(yíng)光(guāng)檢測器,質(zhì)譜(MS)等(děng)。
6.數(shù)據(jù)處理係(xì)統:用於對(duì)分(fēn)離結果的數據進(jìn)行(háng)處(chǔ)理(lǐ)和解(jiě)析,包(bāo)括(kuò)峰識別(bié),定(dìng)量(liáng)分析和(hé)峰(fēng)匹配(pèi)等功能。
二(èr)維(wéi)液(yè)相(xiāng)色譜(pǔ)分離純化係統在(zài)許(xǔ)多(duō)領(lǐng)域都得到了廣泛的(dí)應用(yòng),例如(rú):
1.天(tiān)然(rán)產(chǎn)物(wù)分離:天然(rán)產(chǎn)物通常具(jù)有(yǒu)復雜的(dí)成分和結(jié)構,傳統單一(yī)色譜(pǔ)分(fēn)離方(fāng)法(fǎ)往往無法(fǎ)滿足需(xū)求。2D-LC能夠對復(fù)雜樣(yàng)品進(jìn)行更(gēng)好(hǎo)的(dí)分(fēn)離和純(chún)化,有(yǒu)助於(yú)分(fēn)離和鑒定天然產(chǎn)物中(zhōng)的(dí)活性(xìng)成分。
2.藥物(wù)分(fēn)析(xī):藥(yào)物樣(yàng)品中常常(cháng)存在著各(gè)種雜(zá)質和(hé)異質體(tǐ),通過2D-LC技術可以實(shí)現(xiàn)對藥(yào)物的深(shēn)度分(fēn)析(xī)和(hé)純(chún)化(huà),提高質量和(hé)安(ān)全性。
3.蛋白質分析(xī):蛋白質(zhì)樣(yàng)品復(fù)雜多樣(yàng),2D-LC技術可(kě)以(yǐ)實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質的更(gēng)好分(fēn)離和鑒(jiàn)定(dìng),有助於(yú)研究蛋白質(zhì)的(dí)結(jié)構和(hé)功能。
4.環(huán)境(jìng)分析:環境(jìng)樣品中的(dí)汙染物通(tōng)常存在多種復雜的成分,2D-LC技(jì)術可以(yǐ)對(duì)其(qí)進(jìn)行(háng)更(gēng)精確的分離和純(chún)化,有(yǒu)助於環(huán)境監測(cè)和(hé)保護。