高(gāo)壓製備液相色(sè)譜(pǔ)係(xì)統是一種(zhǒng)用(yòng)於(yú)分離和純(chún)化化合(hé)物的(dí)實(shí)驗(yàn)室(shì)技術,尤(yóu)其(qí)適用(yòng)於有(yǒu)機化(huà)合物(wù),生(shēng)物(wù)大(dà)分(fēn)子如蛋白(bái)質,肽,核酸(suān)等(děng)。與傳(chuán)統的分析型液相色譜相比(bǐ),製(zhì)備(bèi)液(yè)相色譜(pǔ)著重於收集(jí)較(jiào)多量的純化物(wù)質,以(yǐ)便於進(jìn)一(yī)步(bù)的實(shí)驗研(yán)究(jiū)或工業生產。HPLC係統通常包(bāo)括(kuò)幾(jī)個基(jī)本(běn)組件(jiàn):泵,進(jìn)樣器,色譜柱,檢測器(qì)以(yǐ)及(jí)收集(jí)器。工作(zuò)原(yuán)理基於不同(tóng)組(zǔ)分在(zài)移(yí)動相(通(tōng)常為(wéi)溶(róng)劑(jì)混(hùn)合物)和(hé)固定相(色譜(pǔ)柱內的固體(tǐ)填(tián)料)之間分(fēn)配(pèi)係數(shù)的差(chà)異(yì)。當樣品(pǐn)通(tōng)過(guò)進樣器(qì)進入係(xì)統後(hòu),高(gāo)壓(yā)泵(bèng)推動移動相(xiāng)流過(guò)填(tián)充有固(gù)定相的色(sè)譜柱(zhù)。由於不同組(zǔ)分與固定相(xiāng)的相(xiāng)互作(zuò)用強(qiáng)度不同,它們(mén)在柱內(nèi)移動速(sù)度也(yě)不同(tóng),從而(ér)實(shí)現(xiàn)分離。檢測器用(yòng)於(yú)監(jiān)測流出物,並記(jì)錄各組分(fēn)的(dí)保(bǎo)留(liú)時(shí)間(jiān),以(yǐ)便(biàn)於識(shí)別和定量。最終,目標物質被收集在特定(dìng)的餾分中。

1.高效率(shuài):優化的(dí)色(sè)譜柱和(hé)精(jīng)確的流體控製(zhì)係(xì)統(tǒng)能夠(gòu)在(zài)短(duǎn)時間內完成高效(xiào)分(fēn)離。
2.高分辨(biàn)率:可(kě)以很(hěn)好地分(fēn)離(lí)具(jù)有(yǒu)相似性質的復雜混合物(wù)。
3.可(kě)擴(kuò)展性:從毫(háo)克到克(kè)量(liáng)級的樣品(pǐn)都可以(yǐ)適(shì)用(yòng)。
4.自(zì)動化(huà):現代HPLC係統(tǒng)多具備自(zì)動化(huà)操(cāo)作(zuò),減(jiǎn)少了(liǎo)人為誤(wù)差(chà)和提(tí)高了(liǎo)重復(fù)性。
5.多功能(néng)性:配合(hé)不(bù)同(tóng)的色譜(pǔ)柱(zhù)和移動相,可以適(shì)應多(duō)種(zhǒng)化合(hé)物的(dí)分(fēn)離(lí)需求(qiú)。
6.安全性(xìng):高(gāo)壓操(cāo)作(zuò)要(yào)求(qiú)係(xì)統具備(bèi)良(liáng)好的安(ān)全性能,以避免(miǎn)潛(qián)在的(dí)危險。
組成:
1.泵(bèng)係統(tǒng):通(tōng)常(cháng)使用雙(shuāng)泵(bèng)係統(tǒng),一個(gè)用於輸送移(yí)動相,另一(yī)個(gè)用於提(tí)高(gāo)係(xì)統壓力。
2.進樣(yàng)裝(zhuāng)置:可以是(shì)手(shǒu)動(dòng)進(jìn)樣(yàng)或(huò)自(zì)動進樣(yàng)器(qì),用於(yú)引入(rù)樣(yàng)品到色譜(pǔ)係統中(zhōng)。
3.色譜柱(zhù):根據(jù)需要(yào)分離的(dí)物質(zhì)選(xuǎn)擇合(hé)適材(cái)質和(hé)粒徑的(dí)填(tián)充材(cái)料(liào)。
4.檢(jiǎn)測器(qì):常見(jiàn)的有紫(zǐ)外(wài)/可(kě)見光檢測(cè)器(qì),熒光(guāng)檢測(cè)器,蒸發(fā)光(guāng)散(sàn)射檢測器等。
5.收集器(qì):自(zì)動收(shōu)集器(qì)可(kě)以根(gēn)據檢(jiǎn)測(cè)信(xìn)號(hào)收(shōu)集(jí)不同餾(liù)分。
6.控製係(xì)統(tǒng):軟件(jiàn)控(kòng)製(zhì)係(xì)統(tǒng)用(yòng)於設定程序參(cān)數,監控(kòng)設備(bèi)狀(zhuàng)態(tài)和(hé)處理(lǐ)數據(jù)。
應用:
1.藥(yào)物(wù)研(yán)發:用於(yú)合(hé)成化(huà)合物的純化,手性藥(yào)物的拆分等。
2.生(shēng)物技術:蛋(dàn)白質(zhì),多肽,天然(rán)產物(wù)的(dí)提取(qǔ)與純(chún)化(huà)。
3.化(huà)學工程(chéng):精細化工產品(pǐn)的精製,特(tè)殊(shū)化(huà)學品的製備。
4.環境(jìng)分(fēn)析:環(huán)境中(zhōng)汙(wū)染物的檢測和(hé)鑒(jiàn)定。
5.食品工業(yè):食品(pǐn)添(tiān)加(jiā)劑(jì),天(tiān)然(rán)色(sè)素等(děng)的純(chún)化與分析。
高壓製備(bèi)液相(xiāng)色譜(pǔ)係(xì)統的維護與(yǔ)注(zhù)意(yì)事項(xiàng):
1.定期檢(jiǎn)查泵的壓力(lì)是否穩定,密封圈(quān)是否(fǒu)需(xū)要更換。
2.保(bǎo)持(chí)色(sè)譜柱的清(qīng)潔,避免堵(dǔ)塞和(hé)汙染。
3.確保(bǎo)移(yí)動相的脫(tuō)氣和(hé)過濾(lǜ),防止氣泡和(hé)顆粒物(wù)影響分(fēn)離(lí)效(xiào)果(guǒ)。
4.定期(qī)校(xiào)準(zhǔn)檢測(cè)器(qì),確保(bǎo)檢(jiǎn)測結果(guǒ)的準確性。
5.注意安(ān)全操作(zuò),尤其是(shì)在高壓(yā)下工作時(shí)要(yào)特別小心。