半製(zhì)備液相色譜儀(yí)是一種用於分離(lí)和純化化合(hé)物(wù)的(dí)高(gāo)效液(yè)相(xiāng)色譜係(xì)統。主(zhǔ)要用(yòng)於(yú)製備(bèi)和純化目標化(huà)合物(wù),而不(bù)是僅僅對其(qí)進(jìn)行(háng)定(dìng)性和定(dìng)量(liáng)分析(xī)。這(zhè)種儀器(qì)在化學(xué),製藥,生物(wù)技術,環境科(kē)學等領(lǐng)域有(yǒu)著(zhuó)廣泛(fàn)的應用(yòng)。
工(gōng)作(zuò)原(yuán)理與分析型(xíng)液相色譜儀(yí)相似(sì),都(dū)是(shì)基於樣品在固(gù)定(dìng)相和流動(dòng)相(xiāng)之(zhī)間的分(fēn)配(pèi)差(chà)異來(lái)實(shí)現(xiàn)分(fēn)離(lí)。具(jù)體來說(shuō),樣品(pǐn)首先被溶解在(zài)流動(dòng)相中,然後通過高(gāo)壓泵將(jiāng)其送(sòng)入裝(zhuāng)有固定(dìng)相的(dí)色(sè)譜(pǔ)柱。隨(suí)著流動相的(dí)不斷流動,樣(yàng)品中的(dí)各個組分在(zài)固定相和(hé)流(liú)動相之間(jiān)進行反復(fù)的分配,從(cóng)而實現分離。分離後的(dí)組分通過(guò)檢測(cè)器(qì)進行檢測(cè),並記錄其色(sè)譜圖(tú)。
主(zhǔ)要由以(yǐ)下幾個(gè)部(bù)分組成:
高(gāo)壓(yā)恒(héng)流泵:用於(yú)提(tí)供(gōng)穩定(dìng)的高壓流動相,確保(bǎo)樣品在色譜柱(zhù)中(zhōng)的有(yǒu)效(xiào)分(fēn)離。
進(jìn)樣(yàng)器:用(yòng)於將樣品引入(rù)色(sè)譜係統。常(cháng)見(jiàn)的(dí)進(jìn)樣器有手動進樣器和自動(dòng)進樣器。
色譜柱(zhù):裝有固(gù)定相(xiāng),用於實現(xiàn)樣品(pǐn)的(dí)分離(lí)。色譜柱(zhù)的(dí)選擇和填(tián)充(chōng)直接影響分離(lí)效(xiào)果。
檢(jiǎn)測器:用(yòng)於檢(jiǎn)測(cè)分離(lí)後(hòu)的(dí)組分。常見的(dí)檢測(cè)器有(yǒu)紫外檢測(cè)器(UV),熒(yíng)光(guāng)檢測器(qì)(FLD),質(zhì)譜檢(jiǎn)測器(MS)等。
數據(jù)處理(lǐ)係統(tǒng):用於記錄和(hé)分析(xī)檢(jiǎn)測器輸(shū)出(chū)的(dí)信號,生(shēng)成(chéng)色譜(pǔ)圖和相關(guān)數據。
半製備液相色譜(pǔ)儀具(jù)有以(yǐ)下幾(jī)個(gè)顯著的特點和優勢:
高效分(fēn)離(lí):通(tōng)過(guò)選擇合適(shì)的固(gù)定(dìng)相和流動相(xiāng),可(kě)以實現對復雜(zá)樣(yàng)品(pǐn)的高效分離。
高純度製備(bèi):能夠(gòu)從混合(hé)物中(zhōng)純(chún)化(huà)出(chū)高純度的(dí)目標化合物(wù),適(shì)用(yòng)於藥物,天(tiān)然產(chǎn)物(wù)等的(dí)製(zhì)備(bèi)。
靈活性強:可以根(gēn)據(jù)不同(tóng)的分離(lí)需(xū)求,選擇(zé)不同規格的色譜柱和檢(jiǎn)測器,適(shì)應(yīng)性(xìng)強。
自(zì)動化(huà)程度高:通常配(pèi)備(bèi)自(zì)動進樣器和數據(jù)處理係(xì)統(tǒng),操作簡便,效率高。
適用範(fàn)圍(wéi)廣(guǎng):廣泛應(yīng)用(yòng)於化(huà)學,製藥(yào),生物(wù)技(jì)術,環(huán)境(jìng)科學等(děng)領域,具(jù)有(yǒu)廣(guǎng)泛的應(yīng)用前景(jǐng)。
在(zài)多個領域都有著(zhuó)廣(guǎng)泛(fàn)的應用,主(zhǔ)要(yào)包括以下幾(jī)個方麵:
藥物製備(bèi):用(yòng)於製備(bèi)和純(chún)化(huà)藥(yào)物(wù)中間體和成(chéng)品(pǐn)藥物(wù),確(què)保(bǎo)藥物(wù)的(dí)純度(dù)和質量。
天然(rán)產物分離(lí):用於從(cóng)植(zhí)物,動物(wù)等天(tiān)然資源中分(fēn)離(lí)和(hé)純化(huà)活(huó)性成分(fēn),如(rú)生物(wù)鹼(jiǎn),黃酮類化(huà)合(hé)物等。
環境監測(cè):用於(yú)檢測和分(fēn)離(lí)環境樣(yàng)品中的(dí)汙染物,如(rú)農藥(yào),重金屬等。
食(shí)品檢(jiǎn)測(cè):用於檢測和分(fēn)離(lí)食(shí)品中(zhōng)的添加劑,殘留物等,確(què)保(bǎo)食(shí)品(pǐn)安全。
生(shēng)物(wù)技術:用於(yú)分離(lí)和(hé)純化蛋(dàn)白質,核酸(suān)等(děng)生物(wù)大分子,支(zhī)持生物技(jì)術研究和應用(yòng)。

半(bàn)製備(bèi)液相色譜儀的操(cāo)作(zuò)步(bù)驟主(zhǔ)要包(bāo)括(kuò)以(yǐ)下幾個(gè)環(huán)節:
準備工(gōng)作:
打(dǎ)開(kāi)計算機和(hé)儀(yí)器的(dí)電源。
檢查流動相是否(fǒu)足夠,儀(yí)器上記錄的溶劑量是否(fǒu)正確。
打(dǎ)開儀器(qì)的(dí)電源(yuán)開關(guān),一(yī)般(bān)是從(cóng)上到(dào)下,最下麵是檢(jiǎn)測器開關。
係(xì)統平衡:
打開電腦(nǎo),進(jìn)入儀(yí)器在綫(xiàn)軟件(jiàn)界麵。
將泵(bèng)流量設(shè)置為10mL/min,確保(bǎo)有液體(tǐ)流(liú)出儀器。
點(diǎn)擊平衡(héng),然後點擊(jī)每個(gè)波長和(hé)調(tiáo)整,衝洗(xǐ)一(yī)段時間,直(zhí)到壓(yā)力(lì)穩(wěn)定(dìng)。
進樣:
將注射(shè)器擰(níng)至負載向(xiàng)上(shàng),吸取一定(dìng)量的待分(fēn)離液體,並快(kuài)速(sù)注射(shè)。
點(diǎn)擊控製界麵-樣本(běn)信息-設(shè)置信息存(cún)儲路徑(jìng)。
扭(niǔ)動(dòng)進樣(yàng)器使(shǐ)其處於(yú)inload狀態,保留時間(jiān)開(kāi)始計數。
拾峰,待所(suǒ)有峰出來後,點擊(jī)菜(cài)單(dān)欄(lán)中(zhōng)的中斷-中斷,準備重復(fù)進樣(yàng)。
關(guān)閉(bì)係統(tǒng):
點(diǎn)擊(jī)中斷並衝洗幾分鐘,將流(liú)速(sù)設置為(wéi)0。壓力(lì)為(wéi)0後,將吸入(rù)壓頭(tóu)轉移至(zhì)甲(jiǎ)醇,並將(jiāng)流速設置(zhì)為10mL/min。
通常(cháng)需要半(bàn)個(gè)小(xiǎo)時(shí)直(zhí)到什麼(mó)都沒被(bèi)衝走(zǒu),此(cǐ)時壓(yā)力已(yǐ)經穩定(dìng)。
將(jiāng)流量設置為0,點(diǎn)擊(jī)界(jiè)麵(miàn)上的(dí)關(guān)閉(bì)(啟動(dòng)旁邊(biān))。
關(guān)閉(bì)窗口,所有彈出(chū)窗(chuāng)口都(dū)會點擊是。