製備(bèi)液相色譜(pǔ)開(kāi)始(shǐ)階(jiē)段(duàn)是用大(dà)直(zhí)徑的玻(bō)璃管(guǎn)柱在室溫(wēn)和(hé)常壓(yā)下用液位(wèi)差(chà)輸(shū)送流(liú)動(dòng)相，稱為經典液相色譜(pǔ)法，此方法柱(zhù)效(xiào)低(dī)，時(shí)間長(cháng)。液相色(sè)譜法(fǎ)是在經(jīng)典(diǎn)液(yè)相色譜法(fǎ)的基礎上，於60年代後期(qī)引(yǐn)入了氣(qì)相(xiāng)色譜(pǔ)理論(lùn)而迅速發(fā)展起來的。它與經典液(yè)相色(sè)譜法(fǎ)的(dí)區別是(shì)填料顆(kē)粒小(xiǎo)而(ér)均匀，小(xiǎo)顆(kē)粒(lì)具有高柱效(xiào)，但(dàn)會引(yǐn)起(qǐ)高阻力，需(xū)用高壓輸(shū)送(sòng)流(liú)動(dòng)相，故(gù)又(yòu)稱高壓液相色譜(pǔ)法(fǎ)。又因分析速(sù)度(dù)快而稱為高(gāo)速液(yè)相(xiāng)色(sè)譜法(fǎ)，也(yě)稱(chēng)現代液(yè)相色譜(pǔ)。
製(zhì)備液(yè)相(xiāng)色譜分(fēn)類：
1，液(yè)液色譜法(fǎ)：使(shǐ)用(yòng)將(jiāng)特定的液態物質(zhì)塗於(yú)擔體表(biǎo)麵，或化(huà)學(xué)鍵(jiàn)合(hé)於擔體表(biǎo)麵而形成的固定相(xiāng)，分離(lí)原(yuán)理(lǐ)是根據被分(fēn)離的組分在(zài)流(liú)動相和(hé)固定相中溶解(jiě)度不(bù)同(tóng)而(ér)分離。分(fēn)離過程是(shì)一(yī)個分配平衡過(guò)程(chéng)。
2，液(yè)固色譜(pǔ)法(fǎ)：使用固(gù)體吸(xī)附劑，被(bèi)分(fēn)離組(zǔ)分在(zài)色譜柱上分(fēn)離(lí)原(yuán)理(lǐ)是(shì)根據固定相對組(zǔ)分(fēn)吸附力(lì)大小不同(tóng)而(ér)分離。分(fēn)離過(guò)程是(shì)一(yī)個吸附(fù)-解(jiě)吸附(fù)的平衡過(guò)程。常用的(dí)吸附劑(jì)為矽膠或(huò)氧(yǎng)化鋁，粒度5~10μm。適(shì)用於分離分(fēn)子(zǐ)量200~1000的(dí)組(zǔ)分，大多(duō)數用於非(fēi)離(lí)子型(xíng)化(huà)合(hé)物(wù)，離子(zǐ)型化(huà)合物(wù)易(yì)產(chǎn)生拖(tuō)尾。常(cháng)用(yòng)於(yú)分離同分異構(gòu)體(tǐ)。
隨(suí)著(zhuó)柱填(tián)料(liào)的快(kuài)速發(fā)展，反(fǎn)相(xiāng)色譜(pǔ)法(fǎ)的應用(yòng)範圍逐漸擴大，現已應用於某(mǒu)些無(wú)機樣(yàng)品或易解(jiě)離(lí)樣品的(dí)分析。為控(kòng)製樣品在分(fēn)析(xī)過程的(dí)解離，常(cháng)用緩(huǎn)衝液(yè)控(kòng)製流(liú)動相的pH值。但(dàn)需要注(zhù)意(yì)的(dí)是，C18和C8使用的pH值通(tōng)常為(wéi)2.5~7.5(2~8)，太(tài)高的pH值會(huì)使(shǐ)矽膠溶(róng)解，太(tài)低的pH值(zhí)會使鍵(jiàn)合的烷(wán)基(jī)脫落。有報告新(xīn)商(shāng)品柱可在pH1.5~10範圍操作。
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